影响电泳实验结果电泳加工厂家分享

不同的带电颗粒在同一电场中电泳的速度不同。常用电泳度（或迁移率）来表示。电泳度是指带电颗粒在单位电场度下泳的速度。

影响电泳度的主要因素有：

、先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状

一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中电泳速度快，反之则慢。电泳度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，电泳度与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比。带电荷的高分子在电解质溶液中把一些带有相反电荷的离子吸引在其周围，形成一离子扩散层。

加以电场时，颗粒向号相反的电移动即带阳电荷颗粒移向负，带阴电荷颗粒移向正移；离子扩散层由于带有过剩的与颗粒号相反的电荷，可以向相反方向移动。结果颗粒与离子扩散之间的静电引力使颗粒的电泳度减慢，另外，高分了颗粒表面有一层水，在电场影响下，它与颗粒一起移动，可以认为是颗粒的一部分。

、电场度

电场度也称电位梯度，是指单位长度（厘米）物体上的电位降，它对电泳度起着重要的作用。例如纸电泳。测量厘米长纸条两端电压为伏特，则电场度为伏特/厘米=伏特/厘米。

一般，电场度越高，带电颗粒移动速度越快。根据电场度大小，可将电泳分为常压电泳和高压电泳，前者的电压在-伏特，电场度一般是-伏特/厘米；后者电压可-伏特，电场度在-伏特/厘米。常压电泳分离时间需数小时至数天，高压电泳时间短，有时几分钟，高压电泳主要用于分离基酸，肽，核苷酸，由于电压升高，电压也随之增大，故需冷却装置。

、电渗作用　

在物的电泳中，影响电泳的另一个重要因素是电渗作用。所谓电渗就是指在电场中液体对固体物的相对移动，例如在pH.时，血清蛋白质进行纸电泳时，γ球蛋白与其他蛋白质一样带负电荷，应该向正移动，然而它却向负方向移动，这就是电渗作用的结果。滤纸的纤维间具有大量孔隙带有负电荷，如一束毛细管，进行电泳时蛋白质通过这些孔隙向前移动。

纸的孔隙带有负电荷，与带电颗粒一样可以吸引正离子，因此介质沿管壁相对地带的较多的正电荷。在电场中，带负电荷的蛋白质向正移动，而介质却向反向阴移动，从而对蛋白质颗粒的电泳起阻碍作用。由于γ球蛋白分子颗粒大，净电荷较少，移动速度慢，电渗作用大于颗粒向前电泳的力，结果γ球蛋白向后退。而其他血清蛋白质，因分子较小，净电荷较多，电渗作用小于分子向前移动的力，因此分子向前移。所以，血清蛋白质电泳后球蛋白反而在点样位置之后。

、溶液的pH值

溶液的pH值决定了带电颗粒解离的程度，也决定了物质所带净电荷的多少，对于蛋白质，基酸等两性电解质而言，溶液pH值离电点越远，颗粒所带净电荷越多；电泳速度越快；反之则越慢。例如血清中几种主要蛋白质的等电点各不相同，白蛋白等电点是.。

α球蛋白等电点是.，β球蛋白等电点是.，γ球蛋白等电点是.。当在pH.的电泳缓冲液中电泳时，这些蛋白质都带负电荷，它们的电泳速度是白蛋白< α球蛋白>β球蛋白>γ球蛋白。因此，当要分离一种蛋白质混合物时，应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差异的pH值，以利于各种蛋白质分子的解离。同时，为保持电泳过程中溶液pH恒定也须使用缓冲液。

、溶液的离子度

溶液的离子度是另一个重要选择的条件，在保持缓冲能力前提下，离子度要。溶液的离子度越高，带电颗粒电泳速度越慢，反之越快。浓度大的缓冲液在合适电压下，有较低的电阻和较大的电流，产热较高。如果这种额外的热可以驱散，高浓度的缓冲液扩散常数较低，可以产生较窄细的电泳区带。离子度很高时要用低电压，避免过多产热，这样又导致长的电泳时间，以致增加变性和区带分离困难。

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